目的 建立人骨靶向干扰素γ-1b的高效原核表达体系。方法 从Drug Bank数据库下载人干扰素γ-1b氨基酸序列， 在羧基端加上10个天冬氨酸标签作为骨靶向分子。采用大肠杆菌偏爱密码子，DNA Star软件分析获得骨靶向性干 扰素γ-1b的基因序列。人工合成基因序列并克隆入pET3c质粒表达载体。将上述pET3c-rhIFNγ-1b-D10重组表达 载体转入大肠杆菌BL21，筛选高效表达菌株。分离包涵体，8mol/L尿素溶解，利用镍柱亲和层析纯化重组蛋白。 Western blot检测目的蛋白的特异性表达。结果 测序结果显示所克隆的骨靶向rhIFNγ-1b基因序列正确，筛选出 高效表达菌株。经SDS-PAGE显示在相对分子质量19KD处出现特异的目的蛋白表达带，表达量约占全菌蛋白的30%。 表达产物以包涵体形式存在，8mol/L尿素变性后经镍柱亲和层析纯化，纯度大于90%，浓度为0.8mg/mL。Western检 测显示在19KD处出现特异性目的条带。结论 成功在大肠杆菌中表达了人骨靶向干扰素γ-1b，为研究其生物学活性 及用于骨硬化症的治疗奠定基础。